DB32∕T 668-2004 转基因棉花品种 (系) 抗棉铃虫鉴定方法与抗性评定技术规程.pdf

CS65.020.20
B36
DB32
备案号:15657~2004
江苏省地方标准
DB32/T668--2004
转基因棉花品种(系)抗棉铃虫鉴定方法
与抗性评定技术规程
-d
Examining rules for identificate ion method and eval uating standar.
of resi stance of transgenic cotton var ieties or lines to
cotton bo I l worm (He/icoverpa armigera Hubner
2004-07-30发布
2004-09-30实施
江苏省质量技术监督局发布
DB32/T668~200
言
十世纪九十年代以来,利用转基因方式作为一种新的培育抗虫棉品种的技术手段被广泛应用并取
得迅猛进展,不少转基因抗虫棉品种已实现商品化并在生产上大面积种植。近年有关科研成果证明,不
同转基因抗虫棉品种(系),其对棉铃虫等靶标軎虫的抗性程度存有较大差异。为规范转基因棉花品种(系
抗棉铃虫鉴定方法与抗性评定技术,特制定本标准
本标准按GB/T1.1-2000《标准化工作导则第一部分:标准的结构和编写规则》和GB/T1.2
2002《标准化工作导则第二都分:标准中规范性技术要素内容的确定方法》的规定編写
本标准由江苏省农业科学院提出
本标准起草单位:江苏省农业科学院植物保护研究所、江苏省农业技术推广中心
本标准起草人:柏立新、朿審娥、肖留斌、蒋小平、宋锦花
DB32/T668--2004
转基因棉花品种(系)抗棉铃虫鉴定
方法与抗性评定技术规程
范围
本标准规定了转基因棉花种(系)室内与田间抗棉鈴虫鉴定的试验方法、抗性判定标准与综合评
定技术。
本标准适用于转基因棉花品种(孫)对棉铃虫抗性的鉴定与评估。非转蒸因棉花品种(系)对棉铃虫
抗性的鉴定与评估可参照本标准。
规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的
修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标,然而,戴励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用丁本标准。
GB/T15800-195棉铃虫测报调査规范
G3/r17980.4-200田间药效实验准则(一)杀虫剂防治棉铃虫
3术语与定义
下列术语和定义适用于本标准
幼虫发育指数 I arva deve lopment. index
棉铃虫幼虫取食棉花后存活幼呶各龄期个体数与其龄堋的乘积和。可用公式(1)表示
存活幼虫发育指数=1岭幼虫数×1+2岭幼虫数×2+3岭幼虫数X3+4龄幼虫数×415龄幼
虫数X5+6拎幼虫数X6
3.2
蕾铃受害率 infested rate of squares and bo Is
棉铃虫幼虫危害棉花蕾皊数占棉花檀株蕾铃总数的百分率。可用公式(2)表示
蕾皊受害率(‰)=(调查棉株上棉铃虫危害的蕾铃数/调棉株上的蕾铃总數)×100…
4.供试糒铃虫的饲养
4.1养棉铃虫的基本设备
具有调溫和光照设备的养虫室,使温度保持在25°C~28°C之间和保证不小于14小时光照时间,
培养皿、养虫管、养虫架、恫喂幼虫的人工烔料(人工饲料配方和制备方法参见梁革梅等“人工饲辯棉
铃虫技术的改进”,植物保护,1999,25(2):15~17)。饲养成虫用铁纱笼、纱布、剪子、镊子
毛鲢等养虫用具和存放饲料的冰箱及操作台。
4.2棉铃虫成虫的饲养
将羽化后的雌、雄成虫混合放入铁纱笼內,饲喂5%糖水或峰蜜水,任其自由交配,在铁沙笼上覆
盖纱布,使雌峨产卵于纱布上。
4.3的处理
DB32/T668--2004
将同目产卵的纱布放在同一培养皿内,等待卵的化
4.4幼虫饲养
孵化后幼虫接在人工恫料上,刚孵化幼虫用培养皿棄体饲养,2龄~3龄后分管单虫饲养
4.5供鉴定试验用棉铃虫
室内鉴定用孵化后在入工饲料上恫养1d~2d的1龄~2龄幼虫。田间罩笼鉴定用棉皊虫成虫或卵
或初孵幼虫。
5转基因棉花植株的准备
田訶种植
6.转甚因棉花植株抗棉铃虫性鉴定
6.1转基因棉花植株抗棉鈴虫性室內鉴定
6.1.1供试棉苗或棉叶
在供试转基因棉花2叶~3叶期可随机抽样拔取整株棉花幼苗,或在苗大后摘取供试转基因棉株的
自顶部数腰开的第3或第4张叶片,每株仅取1张叶片。
6.1.2供试棉铃虫
1蛉~2龄幼虫,即从卵孵化后在人工烔料上铜养2d~4d的幼虫。
6.1.3试验方法
6.1.3.1双重皿集体饲虫
将取回的棉苗(剪去下端根茎)或棉叶放在双重皿内(大棉苗放1株,大叶放1片,小棉苗放2
株,小叶放2片),皿底用湿滤纸或用小湿棉球将畄棖茎切断处或叶柄的伤口裹紧以保持棉苗或棉叶
在供試期内不干。每皿接幼虫6头~10头(依可供试的虫量定,一繳为8头),每材料的重复各接5
皿,重复3次,票计15皿。接虫后将双重皿封严,防止幼虫逃逸和保持皿内湿度。
6.1.3,2分管单头銅养
将碎叶块放在管内,每管接1头1龄~2龄幼虫,每处理接25管
6.1,3.3试验处理
接幼虫后的双重皿或养虫管放在25℃~28℃的养虫室或培养箱中待检查
6.1.4结果调
检査2次,第1次检査在接虫后第30,第2次在第6C。调查记載内容如下
6.1.4.1幼虫存活情况
检查幼虫死亡虫数与存活虫数,计算死亡率或存活率。若需续观察,可将死亡虫体挑出界讨
6.1.4.2存活幼虫发商进度情况
以目测法观察幼虫生长发育情况,记载存活幼虫发育龄期。存活幼虫发育龄期大体根幼虫体长进
行判断
1一幼虫体长小于3m
2一幼虫体长在3mR~8m
3岭一幼虫体长在9m~14mm;
4龄一幼虫体长在15Im-~24nm;
5龄一幼虫体长在25m~29mm
6龄一幼虫体长大于29m;
另外,可用徽量天平称幼虫体重计算各处理平均单头幼虫体重,以幼虫体重比较幼虫生长发育情况
4.3幼虫取食危害情况